培養(yǎng)基的發(fā)展史

培養(yǎng)基的發(fā)展史
   最初進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)是使用天然培養(yǎng)基,即組織提取物和體液,例如:雞胚浸出液,血清,淋巴液等.隨著細(xì)胞系的不斷增加,對(duì)質(zhì)量更加穩(wěn)定的培養(yǎng)基的需求也不斷地增加,由此出現(xiàn)了化學(xué)成分明確的培養(yǎng)基,它是通過(guò)對(duì)體液成分的分析以及營(yíng)養(yǎng)生物化學(xué)的研究而產(chǎn)生的.Eagle’s Basal Medium[Eagle,1955]以用后繼的Eagle’sMinimal Es-sential Medium (MEM)[Eagle.1959]成為廣泛采用的合成培養(yǎng)基,它們可以添加各種補(bǔ)充成分,如:牛血清,人血清,馬血清,蛋白水解物及胚胎提取物.隨著更多連續(xù)細(xì)胞系的出現(xiàn)(L929,Hela等),各種合成培養(yǎng)基成為培養(yǎng)絕大多數(shù)細(xì)胞最好的選擇.在合成培養(yǎng)基的發(fā)展過(guò)種有幾點(diǎn)成功之處:可替代血清;針對(duì)不同類型的細(xì)胞制備最適宜的培養(yǎng)基(例如:RPMI1640適合于類成淋巴細(xì)胞系);根據(jù)特殊的條件修正培養(yǎng)基(例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963]).
分離和繁殖某種特殊類型的細(xì)胞可能需要一種選擇性的無(wú)血清培養(yǎng)基;而為了得到產(chǎn)物所進(jìn)行的細(xì)胞培養(yǎng)(例如將細(xì)胞作為病毒繁殖的宿主,或?qū)⒓?xì)胞用于非細(xì)胞特異性的分子生物學(xué)研究)則主要依賴于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是現(xiàn)在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].然而許多工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)現(xiàn)在使用的是無(wú)血清培養(yǎng)基,這樣做有利于產(chǎn)物的下游處理并可減少外來(lái)污染.在許多實(shí)驗(yàn)室還流行一種折中的方法:即將一種成分復(fù)雜的培養(yǎng)基(例如Ham’s F12[Ham,1965])與一種氨基酸和維生素含量較高的培養(yǎng)基(例如:DMEM)混合使用.這種培養(yǎng)基不利于純化產(chǎn)物,但對(duì)于原代培養(yǎng)以及細(xì)胞系的繁殖卻可以產(chǎn)生多方面的促進(jìn)作用.



DC2.4 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)基本要點(diǎn)
細(xì)胞增殖的控制