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            猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞分離液試劑盒(分子生物學(xué)及細(xì)胞培養(yǎng)專用)
            產(chǎn)品編號:WBC1078HZ
            別名 猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞分離液試劑盒(分子生物學(xué)及細(xì)胞培養(yǎng)專用) 
            英文名  
            猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞分離液試劑盒(分子生物學(xué)及細(xì)胞培養(yǎng)專用)
            中文名稱:猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞分離液試劑盒(分子生物學(xué)及細(xì)胞培養(yǎng)專用)
            中文別名:猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞分離液試劑盒(分子生物學(xué)及細(xì)胞培養(yǎng)專用)
            產(chǎn)品類別:組織白細(xì)胞的分離
             
            產(chǎn)品編號:WBC1078HZ
             
            產(chǎn)品名稱:猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞分離液試劑盒(分子生物學(xué)及細(xì)胞培養(yǎng)專用)
             
            產(chǎn)品規(guī)格:200ml/KIT
             
            產(chǎn)品價格:¥650.00元
             
            本品用于分離猴腫瘤浸潤組織白細(xì)胞



            “XXXX”動物組織白細(xì)胞分離液實(shí)驗(yàn)方法
             
            (細(xì)胞培養(yǎng)及分子生物學(xué)專用)
             
            技術(shù)文檔編號:TBD0032SOP
             
            【產(chǎn)品規(guī)格】
             
            200ml/Kit
             
            【產(chǎn)品組成】
             
            為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
             
              名稱 產(chǎn)品編號 規(guī)格
                   
            A XXXX 動物組織白細(xì)胞分離液   200ml
                   
            B 樣本稀釋液(贈品) 2010C1119 200ml
                   
            C 清洗液(贈品) 2010X1118 200ml
                   
            D F 液(贈品) F2013TBD 200ml
            E 紅細(xì)胞裂解液(贈品) NH4CL2009 100ml
            F 說明書   1 份
                   
             
            【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
             
            適用儀器:最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
             
            【檢驗(yàn)方法】
             
            全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
             
            • 首先制備組織單細(xì)胞懸液,制備方法詳見“組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)”。
             
            • 取一支 15ml 離心管,加入與制備的組織單細(xì)胞懸液等量的分離液(注:分離液最少不得少于 5ml)。
             
            • 用吸管小心吸取制備的組織單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,500-800g,離心 20-30min。(注:根據(jù)組織單細(xì)胞懸液樣本量確定離心條件,組織單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達(dá)到最佳分離效果)。
             
            • 離心后用吸管小心吸取所有環(huán)狀乳白色細(xì)胞層(一層或兩層),加入 10 ml 清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細(xì)胞。250g,離心 10min。重復(fù)洗滌 2-3 次,即得所需白細(xì)胞。
             
            • 如有紅細(xì)胞殘留請使用紅細(xì)胞裂解液(產(chǎn)品編號:NH4CL2009)裂解紅細(xì)胞,具體操
             
            作方法詳見“紅細(xì)胞裂解液使用說明”。
             
            【注意事項(xiàng)】
             
            • 全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,最好在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣品存放時間越長,細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
             
            • 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。
             
            • 分離液用量大于制備的組織單細(xì)胞懸液樣本時,分離效果更佳。
             
            • 如實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低,請聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助。
             
            【儲存條件及有效期】
             
            常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
             
            封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
             
            【參考值(參考范圍)】
             
            本實(shí)驗(yàn)白細(xì)胞提取率及純度大于 80%。
             
            下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
             
                紅細(xì)胞     白細(xì)胞   血小板
                           
                    (4.0-10.0)×109  
            含量(個/L) (4.0-5.5)×1012   中性粒細(xì)胞 淋巴細(xì)胞 單核細(xì)胞 (1.0-3.0)×1011
                    50%-70% 20%-40% 3%-8%  
                         
            【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】        
            1. 組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)        
            2. 所獲得白細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。        
            3. 所獲得白細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。        
            4. 所獲得白細(xì)胞的鑒定方法        
              A.流式細(xì)胞技術(shù)        
             
            B.免疫組化技術(shù)
             
            C.原位雜交技術(shù)
             
            D.PCR 技術(shù)
             
             
             
              純化、擴(kuò)增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊,并在說明書項(xiàng)目欄下下載使用。    
              【可能存在的問題及解決方法】      
              1.   由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:
                   
              出現(xiàn)情況 出現(xiàn)原因 建議解決方案
                     
              離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層 轉(zhuǎn)速過小或離心時間過短 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速
                 
              離心后目的細(xì)胞存在于分離液中 轉(zhuǎn)速過大或離心時間過長
                 
                     
              離心后白環(huán)層彌散 細(xì)胞密度過大 調(diào)整細(xì)胞密度
                 
              離心后白環(huán)層太淺或看不見 細(xì)胞密度過小
                 
                     
             
            • 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對離心條件進(jìn)行調(diào)整時,恒定離心時間,對離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。
             
            • 本分離液依照國際標(biāo)準(zhǔn),全部使用藥用級原料,性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
             
            注:在對離心條件進(jìn)行調(diào)整時,離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達(dá)到最佳分離效果,
             
            離心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準(zhǔn)。
             
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