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            羊臟器組織白細胞分離液試劑盒(分子生物學及細胞培養專用)
            產品編號:WBC1087P
            別名 羊臟器組織白細胞分離液試劑盒(分子生物學及細胞培養專用) 
            英文名  
            羊臟器組織白細胞分離液試劑盒(分子生物學及細胞培養專用)
            中文名稱:羊臟器組織白細胞分離液試劑盒(分子生物學及細胞培養專用)
            中文別名:羊臟器組織白細胞分離液試劑盒(分子生物學及細胞培養專用)
            產品類別:組織白細胞的分離
             
            產品編號:WBC1087P
             
            產品名稱:羊臟器組織白細胞分離液試劑盒(分子生物學及細胞培養專用)
             
            產品規格:200ml/KIT
             
            產品價格:¥650.00元
             
            本品用于分離羊臟器組織白細胞







            “XXXX”動物組織白細胞分離液實驗方法
             
            (細胞培養及分子生物學專用)
             
            技術文檔編號:TBD0032SOP
             
            【產品規格】
             
            200ml/Kit
             
            【產品組成】
             
            為方便廣大用戶使用,試劑內容如下:
             
              名稱 產品編號 規格
                   
            A XXXX 動物組織白細胞分離液   200ml
                   
            B 樣本稀釋液(贈品) 2010C1119 200ml
                   
            C 清洗液(贈品) 2010X1118 200ml
                   
            D F 液(贈品) F2013TBD 200ml
            E 紅細胞裂解液(贈品) NH4CL2009 100ml
            F 說明書   1 份
                   
             
            【實驗前準備】
             
            適用儀器:最大離心力可達 1200g 的水平轉子離心機
             
            【檢驗方法】
             
            全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。
             
            • 首先制備組織單細胞懸液,制備方法詳見“組織單細胞懸液制備技術”。
             
            • 取一支 15ml 離心管,加入與制備的組織單細胞懸液等量的分離液(注:分離液最少不得少于 5ml)。
             
            • 用吸管小心吸取制備的組織單細胞懸液加于分離液液面上,500-800g,離心 20-30min。(注:根據組織單細胞懸液樣本量確定離心條件,組織單細胞懸液量越大,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果)。
             
            • 離心后用吸管小心吸取所有環狀乳白色細胞層(一層或兩層),加入 10 ml 清洗液(產品編號:2010X1118),混勻細胞。250g,離心 10min。重復洗滌 2-3 次,即得所需白細胞。
             
            • 如有紅細胞殘留請使用紅細胞裂解液(產品編號:NH4CL2009)裂解紅細胞,具體操
             
            作方法詳見“紅細胞裂解液使用說明”。
             
            【注意事項】
             
            • 全過程樣本、試劑及實驗環境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結果,最好在取樣 2h 內進行實驗,樣品存放時間越長,細胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
             
            • 本實驗最好不要使用高聚合材質(如聚苯乙烯)的塑料制品,應使用無靜電、低靜電離心管及未經堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
             
            • 分離液用量大于制備的組織單細胞懸液樣本時,分離效果更佳。
             
            • 如實驗后細胞得率或活性過低,請聯系技術支持以尋求幫助。
             
            【儲存條件及有效期】
             
            常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
             
            封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現白色結晶,影響分離效果。
             
            【參考值(參考范圍)】
             
            本實驗白細胞提取率及純度大于 80%。
             
            下表為成年人外周血中各種細胞的數量及比例,用戶可適當進行參考。
             
                紅細胞     白細胞   血小板
                           
                    (4.0-10.0)×109  
            含量(個/L) (4.0-5.5)×1012   中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞 (1.0-3.0)×1011
                    50%-70% 20%-40% 3%-8%  
                         
            【相關實驗技術方案】        
            1. 組織單細胞懸液制備技術        
            2. 所獲得白細胞的培養技術。        
            3. 所獲得白細胞的核酸提取技術。        
            4. 所獲得白細胞的鑒定方法        
              A.流式細胞技術        
             
            B.免疫組化技術
             
            C.原位雜交技術
             
            D.PCR 技術
             
             
             
              純化、擴增、鑒定及生物治療技術手冊,并在說明書項目欄下下載使用。    
              【可能存在的問題及解決方法】      
              1.   由于血液粘度、細胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:
                   
              出現情況 出現原因 建議解決方案
                     
              離心后目的細胞存在于血漿層或稀釋液層 轉速過小或離心時間過短 適當增減轉速
                 
              離心后目的細胞存在于分離液中 轉速過大或離心時間過長
                 
                     
              離心后白環層彌散 細胞密度過大 調整細胞密度
                 
              離心后白環層太淺或看不見 細胞密度過小
                 
                     
             
            • 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關。不同地區客戶可根據當地情況對離心條件進行適當調整。建議對離心條件進行調整時,恒定離心時間,對離心轉速進行調整。
             
            • 本分離液依照國際標準,全部使用藥用級原料,性能指標與國產同類產品略有不同,可能出現紅細胞沉降不完全的情況,可以適當加大離心轉速。
             
            注:在對離心條件進行調整時,離心轉速的加減以 50-100g 為基數,直至達到最佳分離效果,
             
            離心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準。
             
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