產(chǎn)品類別：紅細(xì)胞的分離
 
產(chǎn)品編號：HES-TBD550
 
產(chǎn)品名稱：羥乙基淀粉550(本公司專利產(chǎn)品)
 
產(chǎn)品規(guī)格：200ml/瓶
 
產(chǎn)品價格：￥180.00元
 
本公司專利產(chǎn)品：羥乙基淀粉商品名為HES-TBD550（羥乙基淀粉550），克分子滲透壓為308 mosm／L，膠體滲透壓為68／36 mmHg,可影響紅細(xì)胞集聚性沉降率。紅細(xì)胞集聚是可遞性橋接結(jié)構(gòu)形成的結(jié)果，由大的HES-TBD550（羥乙基淀粉550）分子處在紅細(xì)胞之間聯(lián)接而成。HES-TBD550（羥乙基淀粉550）同時還阻礙白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，并使平均血小板容積呈現(xiàn)微弱地降低，從而有輕度抑制血小板集聚的功能。臍血經(jīng)HES-TBD550（羥乙基淀粉550）處理后，可使紅細(xì)胞沉積至試管底，對其它主要成分包括干細(xì)胞無影響。經(jīng)這樣處理后，實(shí)驗時間相對較短（平均為1.5 h），步驟相對較少，細(xì)胞污染幾率小，從而使細(xì)胞數(shù)損失減少。結(jié)論證明，與相應(yīng)的干細(xì)胞分離液聯(lián)合分離使用羥乙基淀粉沉淀法是一種高效的臍血干細(xì)胞分離方法。 
 
HES-TBD550 （ 羥乙基淀粉 550）
 
 
 
【產(chǎn)品介紹】
 
HES 是從支鏈淀粉衍生出來的，是富含淀粉的復(fù)合物，其生理和化學(xué)特性主要由羥乙基
 
取代度即取代級、平均分子量決定。大量實(shí)驗表明平均分子量越大對紅細(xì)胞的凝集作用越強(qiáng)，有效提高紅細(xì)胞的沉降速度，從而使紅細(xì)胞與其它細(xì)胞分離。故而，使用 HES-TBD550（羥
 
乙基淀粉 550）沉淀法是一種高效的細(xì)胞分離方法。
 
利用 HES-TBD550（羥乙基淀粉 550）與白細(xì)胞分離液聯(lián)合使用，可以高效的使白細(xì)胞
 
與紅細(xì)胞得以分離，所獲得的白細(xì)胞純度高且可保持完好的生物活性和完整的細(xì)胞形態(tài)。
 
間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells ,MSCs) 是指一群可向成骨細(xì)胞、成脂肪細(xì)胞、骨髓基質(zhì)細(xì)胞、肝臟細(xì)胞、心肌細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞等多種細(xì)胞分化的多潛能組織干細(xì)胞,是在細(xì)胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工程細(xì)胞。MSCs 不僅存在于骨髓,也可從臍血、外周血中以及脂肪組織、肌肉、胎兒器官、大腦、牙齒中分離。UCB - MSCs 的分離、篩選、增殖、分化與臍血樣本的選擇、培養(yǎng)基的差異以及分離、擴(kuò)增分化過程中操作技術(shù)等多種因素有關(guān)。目前用于 UCB - MSCs 分離的方法有:貼壁篩選法、密度梯度離心法、流式細(xì)胞儀法和免疫磁珠法。流式細(xì)胞儀法對細(xì)胞損傷較大，免疫磁珠法價格相對較貴且由于抗原抗體反應(yīng)也容易改變細(xì)胞原有特性，而 HES-TBD550（羥乙基淀粉 550）聯(lián)合密度梯度離心法常與貼壁篩選法結(jié)合使用,可提高所得 UCB-MSCs 的純度，目前研究多采用此法。國內(nèi)不少學(xué)者采用羥乙基淀粉沉淀紅細(xì)胞，然后再進(jìn)行離心分離單個核細(xì)胞，也取得不錯結(jié)果。實(shí)驗證明采用隨機(jī)數(shù)字表法，將每份臍血隨機(jī)分入兩個不同處理組，從而將臍血樣本的個體差異減小到最小程度。結(jié)果證實(shí)，HES-TBD550（羥乙基淀粉 550）聯(lián)合密度梯度離心法獲得的有核細(xì)胞數(shù)量明顯多于 FICOLL 密度梯度離心法。本實(shí)驗采用的羥乙基淀粉商品名為
 
HES-TBD550（羥乙基淀粉 550），克分子滲透壓為 308mosm／L，膠體滲透壓為 68／36 mmHg,
 
可影響紅細(xì)胞集聚性沉降率。紅細(xì)胞集聚是可遞性橋接結(jié)構(gòu)形成的結(jié)果，由大的 HES-TBD550
 
（羥乙基淀粉 550）分子處在紅細(xì)胞之間聯(lián)接而成。HES-TBD550（羥乙基淀粉 550）同時
 
還阻礙白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附，并使平均血小板容積呈現(xiàn)微弱地降低，從而有輕度抑制血小板集聚的功能。臍血經(jīng) HES-TBD550（羥乙基淀粉 550）處理后，可使紅細(xì)胞沉積至試管
 
底，對其它主要成分包括干細(xì)胞無影響。經(jīng)這樣處理后，實(shí)驗時間相對較短（平均為 1.5 h），步驟相對較少，細(xì)胞污染幾率小，從而使細(xì)胞數(shù)損失減少。結(jié)論證明，與相應(yīng)的干細(xì)胞分離

液聯(lián)合分離使用羥乙基淀粉沉淀法是一種高效的臍血干細(xì)胞分離方法。
 
【使用方法】方法一：傳統(tǒng)方法
 
 
 
注：吸取上清用細(xì)胞洗滌液（Cat#：2010X1118）洗滌備用，用戶可根據(jù)實(shí)際情況收集紅細(xì)胞重復(fù)上述步驟。
 
方法二：最大數(shù)量目的細(xì)胞提取方法
 

• 取新鮮抗凝血一份與一份羥乙基淀粉 550（Cat#：HES-TBD550）混勻，30℃-37℃反應(yīng) 5-10 分鐘（5ml 以下樣本反應(yīng) 5 分鐘，5ml 以上樣本反應(yīng) 10 分鐘）。

 

• 反應(yīng)后再與一份全血及組織勻漿稀釋液（Cat#：2010C1119）混勻，室溫（25℃-30℃）自然沉降 30 分鐘。

 

• 將上清小心加于相應(yīng)細(xì)胞分離液之液面上，按照相應(yīng)分離液說明書方法進(jìn)行離心操作；另將沉淀的紅細(xì)胞用全血及組織勻漿稀釋液（Cat#：2010C1119）重新懸起，并小心加于細(xì)胞分離液之液面上，按照相應(yīng)分離液說明書方法進(jìn)行離心操作；

 

• 離心后根據(jù)對應(yīng)說明書方法收集步驟 3 中兩個離心管所富集的目的細(xì)胞，獲得最大數(shù)量的目的細(xì)胞。

 
 
方法三：最高純度目的細(xì)胞提取方法
 
在使用目的細(xì)胞分離液離心分離步驟后，吸取目的細(xì)胞層，按照“方法一”中操作步驟將目的細(xì)胞提純,棄去紅細(xì)胞。
 
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
 
溶液 注射用水
 
滲透壓 280-340mOsmol/kg

內(nèi)毒素	﹤0.5EU/ml
無菌	直接接種培養(yǎng) 14 天后培養(yǎng)基澄清
澄明度及不溶性顆粒物	每 50ml 溶液中含 10μm 以上的不溶性微粒
	20 粒以下，含 25μm 以上的不溶性微粒 5 粒
	以下
無支原體無病毒	已檢測
保存期限	2 年
貯藏	4℃—25℃

 
 
【產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)編號】
 
【注意事項】
 

• 啟封后應(yīng)置 4℃保存，避免微生物的污染。

 

• 整個分離過程中，溫度應(yīng)控制在 20℃±2℃且在無菌環(huán)境下進(jìn)行，避免微生物的污染，否則會影響分離質(zhì)量。

 
 
 
【參考文獻(xiàn)】
 
［1］ Meier C, Middelanis J, Wasielewski B, et al. Spastic paresis after perinatal brain damage in rats Is reduced by human cord blood mononuclear cells［J］. Pediatric Research, 2006,59(2):244-249.
 
［ 2 ］ Boyle AJ, Schulman SP, Hare JM , et al. Stem cell therapy for cardiac