提供商:         上海研謹(jǐn)生物
服務(wù)名稱:       蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)
規(guī)格:           實(shí)驗(yàn)服務(wù)
價(jià)格：          500元
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢?cè)斦劊覀儠?huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
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蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)
 
 
實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)介:
雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS -PAGE的組合，即先進(jìn)行等電聚焦電泳(按照pI分離)，然后再進(jìn)行SDS-PAGE (按照分子大小)， 經(jīng)染色得到的電泳圖是個(gè)二維分布的蛋白質(zhì)圖。
 
實(shí)驗(yàn)原理:
雙向電泳是目前為止zui有效、使用最多的蛋白分離方法。差異蛋白質(zhì)組學(xué)是在雙向電泳后用考麻斯亮藍(lán)、銀離子或熒光染料等將蛋白斑點(diǎn)染色,然后比較差異。本公司在各類微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)植物組織(如動(dòng)物軟硬組織、體液、植物種子、葉子等)、亞細(xì)胞組分的雙向電泳分離及后續(xù)質(zhì)譜鑒定中均有豐富的經(jīng)驗(yàn)。
 
蛋白質(zhì)組學(xué)雙向電泳技術(shù)服務(wù)項(xiàng)目:
1.根據(jù)客戶需求定制蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)方案
2.各種規(guī)格膠條長(zhǎng)度的雙向電泳
3.考麻斯亮藍(lán)染色、銀離子染色; .
4.DIGE系統(tǒng)雙向電泳。
5.圖像分析
6.切膠質(zhì)譜分析
 
服務(wù)說(shuō)明:
1.我們的實(shí)驗(yàn)只對(duì)我們制作的樣本負(fù)責(zé),如您提供的是直接做等點(diǎn)聚焦的樣本，我們不敢保證蛋白的有效分離。
2.蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)的總體實(shí)驗(yàn)流程;
 
實(shí)驗(yàn)流程:
1、樣本制備
2、固相預(yù)制膠條水化
3、第--向等電聚焦(IEF)
4、膠條平衡→第二向SDS-PAGE電泳
5、凝膠染色檢測(cè)
6、圖片掃描
 
雙向電泳服務(wù)結(jié)果提交:
1、實(shí)驗(yàn)的試劑耗材、儀器設(shè)備、操作過程--份;
2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果凝膠掃描圖片;
3、電泳凝膠(可收費(fèi)干膠) ;
4、剩余樣本。
 
說(shuō)明:
1.樣品制備指可用通常程序處理的原樣，如樣品較特殊(需要去除核酸、鹽等雜質(zhì)或需要濃縮)，價(jià)格將視進(jìn)一步處理的難度和耗材用量另行商定;
2.建議客戶提供的原樣(組織、細(xì)胞、菌體等)濕重不少于100mg如直接提供蛋白提取物，則濃度不少于4ug/ul,總量不少于5mg;
3.樣品的還原和烷基化過程一般在制備時(shí)進(jìn)行;
4.圖象處理與切膠主要是手I操作成本。
 
客戶方需提供:
細(xì)胞，組織或蛋白。
 
實(shí)驗(yàn)周期:
5-10天
 
可提供技術(shù)支持: .
1、從現(xiàn)有的生物有機(jī)體基因組中,經(jīng)過酶切消化或PCR擴(kuò)增等方法，獲得帶有目的基因的DNA片段。
2、在體外，將帶有目的基因的外源DNA片段連接到具有選擇標(biāo)記的載體分子上,形成能夠自主復(fù)制的重組DNA分子。
3、將重組DNA分子轉(zhuǎn)移到適宜的受體細(xì)胞，并使其一起增殖。
4、從大量的細(xì)胞繁殖群體中，篩選出獲得了重組DNA分子的受體細(xì)胞克隆。
5、由篩選出來(lái)的受體細(xì)胞克隆，提取出已經(jīng)得到擴(kuò)增的目的基因，供進(jìn)一步分析研究使用。
6、將分離到的目的基因克隆到表達(dá)載體上，導(dǎo)入受體細(xì)胞，使之在新的遺傳背景下實(shí)現(xiàn)功能表達(dá)，產(chǎn)生出人類所需要的物質(zhì)。